دانلود پاورپوینت آزمایشگاه بیو شیمی با فرمت ppt ودر 121 اسلاید قابل ویرایش

قسمتی از متن پاورپوینت

کاربرد اسپکترو فتو متری در بیو شیمی

1 – اسپكتروفتومتري

بوسيله اسپكتروفتومتر شدت رنگ محلولها را با دقت اندازه گيري مي كنند.

دستگاههائي كه براي رنگ سنجي به كار برده مي شوند الكتروفتومترو يا اسپكتروفتومتر ناميدهمي شوند.

شماي ساده زير قسمتهاي مختلف يك الكتروفتومتر را نشان مي دهد.

بطور كلي هر اسپكتروفتومتر: يك منبع نوراني، يك وسيله ايجاد نور تكرنگ با طول موج مشخص يك سلول يا لوله مخصوص براي جادادن محلول رنگي ، يك سلول فتوالكتريك و يك گالوانومتر دارد.

اندازه گيري غلظت يك محلول

به دو روش مي توان غلظت يك محلول را اندازه گيري كرد:

الف) از راه اندازه گيري نوري كه از محلول رنگي خارج مي شود و

به آن ،Transmitance ،یا عبور می گویند؛

ب) اندازه گيري مقدار نوري كه جذب محلول رنگي مي شود و به آن دانسيته اپتيك (OPTICAL DENSITY) O.D يا آبسوربنس مي گويند.

الف) دانسيته اپتيك يا آبسوربنس

نوري كه از يك محلول رنگي عبور مي كند مقداري از آن جذب محلول رنگي ميشود .

اگر Io شدت نور اوليه و I شدت نور خارج شده از محلول باشد بنابراين I a شدت نوري است كه جذب محلول رنگي گرديده است.

Ia = I - Io

Log Io - log I =OD = Absorbanc

logI/I0=OD

§جذب از دو قانون پيروي مي كند: §مطابق قانون بيرولامبرت (BEER & LAMBERT) هنگاميكه نور يك رنگ از محلول رنگي عبور ميكند مقدار نوري كه به وسيله محلول جذب مي شود ويا مقدار نوري كه از محلول خارج مي شود؛ § به غلظت ماده رنگي موجود در محلول §به ضخامت لوله ايكه نور از آن عبور كرده بستگي دارد گردد.یعنی: OD=KCL = جذ ب

قانون بیر لامبرت

logIo/I= KCL

كه در آن K ضريب جذب ماده مورد آزمايش، C غلظت جسم مورد آزمايش و L قطر لوله مي باشد و چون معمولاً قطر لوله را مساوي يك سانتي متر اختيار ميكنند بنابراين خواهيم داشت: OD= log I0/I=KC

K يا ضريب جذب ماده براي مواد مختلف فرق مي كند و به آساني قابل اندازه گيري است.

میزان عبور یا ترا نسمیتا نس

ب) ترانسميتانس ) عبور) :

مقدار نوري است كه از محلول رنگي مورد آزمايش خارج مي شود،

اگر شدت نور اوليI0و نور خارج شده I باشد:

I0-I=Ia

I/I0=TLog I0/I=Log1/TOD=Log1/T

مثال در مورد جذب وعبور

اگر نور وارد شده در محلول 100 و نور خارج شده از آن 10 درصد نور اوليه باشد خواهيم داشت:

OD= log 100 –log 10

OD= 2-1

OD =1

نحوه درجه بندی دستگاه اسپکتروفوتومتر